看這兒，大鼠ELISA檢測試劑盒的使用方法和選購常識(shí)介紹
實(shí)際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的
大鼠ELISA檢測試劑盒的雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。
大鼠ELISA檢測試劑盒選購知識(shí)：
01.特異性
大鼠ELISA檢測試劑盒的特異性與試劑盒的要害組分、抗體對(duì)有關(guān)，若抗體對(duì)中之一為多抗，另一個(gè)有必要為單抗，主張運(yùn)用雙單抗。
02.活絡(luò)度
大鼠ELISA檢測試劑盒的活絡(luò)度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢目標(biāo)的量挑選適宜的試劑盒，假如待檢目標(biāo)量很低，一般的試劑盒不能滿足要求，可挑選高敏的elisa試劑盒。
03.重復(fù)性
科學(xué)試驗(yàn)講究重復(fù)性，一般大鼠ELISA檢測試劑盒，其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在15%以內(nèi)。
04.簡便性
大鼠ELISA檢測試劑盒在確保高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下，試驗(yàn)時(shí)刻越短，操作越便當(dāng)，越簡單受到用戶歡迎!這也不妨作為挑選試劑盒的一個(gè)目標(biāo)。
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